荧光波长范围一般为多少?荧光怎么检测出来?

荧光波长范围一般为多少?荧光怎么检测出来?

博精科技的技术工程师在一个仪器专业讨论区看到一则问题?题主给的题目是:怎样的分光光度计才能检测物质的荧光呢?下面解答不一,我这边也从不同渠道收集整理一些关于荧光分光光度计的介绍分享出来,希望帮助到各位有需要的老师。如信息有偏差欢迎联系指正!

首先并没有一款检测仪器叫分光光度计,这是一类检测仪器的统称,分光光度计,又称光谱仪,是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。

荧光波长范围一般为多少?荧光怎么检测出来?

检测荧光的仪器:分子荧光光谱仪又称荧光分光光度计有的场合也叫荧光光谱仪,是一种定性、定量分析的仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是240~1000nm,发射波长扫描范围是200~900nm。可扩展至1700nm或更远。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。

荧光波长范围一般为多少?荧光怎么检测出来?

荧光分光光度计结构示意图

荧光分光光度计的检测原理是分子发光包括荧光、磷光、化学发光、生物发光和散射光谱等。基于化合物的荧光测量而建立起来的分析方法称为分子荧光光谱法。由光源发出的光通过切光器使其变成断续之光,通过激发光单色器变成单色光,此光即为荧光物质的激发光。被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光,经过单色器变成单色荧光后照射于光电倍增管上,由其所发生的光电流经过放大器放大输至记录仪。一个激发,一个发射,采用双单色器系统,可分别测量激发光谱和荧光光谱。

荧光分析法是测定物质吸收了一定频率的光以后,物质本身所发射的光的强度。物质吸收的光,称为激发光;物质受激后所发射的光,称为发射光或荧光。如果将激发光用单色器分光后,连续测定相应的荧光的强度所得到的曲线,称为该荧光物质的激发光谱 。 实际上荧光物质的激发光谱就是它的吸收光谱。在激发光谱中最大吸收处的波长处,固定波长和强度,检测物质所发射的荧光的波长和强度,所得到的曲线称为该物质的荧光发射光谱,简称荧光光谱 。在建立荧光分析法时,需根据荧光光谱来选择适当的测定波长。激发光谱和荧光光谱是荧光物质定性的依据。某些物质的分子能吸收能里而发射出荧光,根据荧光的光谱和荧光强度,对物质进行定性或定里的方法,称为荧光分析法。对于某一荧光物质的稀溶液,在一定波长和一定强度的入射光照射下,当液层的厚度不变时,所发生的荧光强度和该溶液的浓度成正比,这是荧光定量分析的基础。

应用范围:

生态地质研究:使用“荧光标记”方法对水文地质过程进行研究。港口,河流和水库水域油

品的污染源;外部因素对天然水体中油品生物降解过程的研究;水库生物活性对叶绿素荧光

的研究;

生物应用:包括:核酸研究,如DNA和 RNA、蛋白质研究、酶动力学、细胞研究,包括细胞内离子测定;

科学研究:测量发光光谱特性,研究有机和无机发光物质,发光标签,嵌入生物物体中;

法医检查:油墨,纸张等的光谱特性分析对象,荧光粉,其他发光粉末的光谱纯度分析;

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